
膜蛋白酵母双杂交系统(DUAL membrane system)突破了传统酵母双杂交的局限,扩大了酵母双杂交的应用范围。在传统的酵母双杂交系统的基础上,提供了不同于常规的蛋白体内分析方法,使得分析膜蛋白间的互作成为现实。其主要特点是既可以用于表达文库的筛选,也可以进行膜蛋白-膜蛋白、膜蛋白-可溶性蛋白间的互作关系验证。


膜蛋白酵母双杂交系统是基于分离的泛素(split-ubiquitin)所介导的报告系统,即泛素的两个组成部分:N端部分(Nub)和C端部分(Cub)。Cub可融合能启动细胞核内报告基因表达的LexA-VP16转录激活因子。将待检测蛋白分别构建到泛素的两个组成结构上,通过待检测蛋白质之间的相互作用将突变的、分离的泛素分子N端和C端部分融合,经过泛素蛋白酶UBPS的识别和切割使LexA-VP16解离入核,从而激活报告基因表达。

客户提交实验材料详细信息(候选蛋白序列、顺式调控元件DNA序列等)—客户提交信息确认—诱饵菌株及猎物菌株构建—诱饵菌株自激活检测—酵母共转化互作筛选及稀释点种验证—数据采集及处理并撰写提交实验报告

(1)提供足量的大肠文库甘油菌和文库质粒或者酵母文库甘油菌(文库容量>1X107 CFU、阳性率>95%);
(2)详细的word电子版实验报告(含原始实验数据);
(3)阳性克隆测序结果。