技术应用

SMART技术是利用逆转录酶内源的末端转移酶活性，只需少量的Total RNA就可得到高质量、高产量的cDNA文库，更重要的是得到的cDNA能够代表原有样品中的mRNA的丰度，可以应用于直接扩增基因、构建cDNA文库、已知序列钓全长cDNA以及用于芯片检测探针的扩增等。

技术原理

SMART (Switching Mechanism At 5'end of the RNA Transcript)技术是在合成cDNA的反应中通过使用3'末端带Oligo(dG)的引物,在逆转录酶的作用下以mRNA为模板合成cDNA的一种实验技术。其利用真核mRNA 的5'未端特有的“帽子结构”,使用SMART引物的Oligo(dG)与合成cDNA末端配对后形成cDNA的延伸模板,逆转录酶会自动转换模板，继续延伸cDNA单链直到引物的末端，并通过RT-PCR合成第二链获得dS-cDNA。由于有5'帽子结构的mRNA才能利用这个反应得到能扩增的cDNA，因此扩增得到的cDNA就是全长cDNA。

服务流程

客户提交实验材料详细信息(建库组织样品或总RNA，候选蛋白序列信息)—总RNA提取cDNA合成及载体重组—转化大肠杆菌或酵母菌制备文库—文库质量检测及质粒提取—诱饵菌株自激活检测及互作筛选—数据采集及处理并撰写提交实验报告。

交付内容

（1）提供足量的大肠文库甘油菌和文库质粒或者酵母文库甘油菌(文库容量>1x10⁷ CFU、阳性率>95%)；

（2）详细的word电子版实验报告(含原始实验数据)；

（3）阳性克隆测序结果。