技术原理

CRISPR/Cas系统是细菌免疫系统的一部分，经过人工的优化CRISPR/Cas9系统，操作简单，可以针对更广泛的物种进行基因编辑。其介导基因编辑的原理是CRISPR/Cas9系统中的gRNA引导Cas9蛋白，识别靶基因进行双链切割靶标序列；基因组DNA被切割后，造成双链断裂(DSB)，利用细胞会进行修复切割位置，而修复方式有两种，一种是同源重组修复(HDR)；另一种是非同源末端连接(NHEJ)；借助NHEJ的修复机制,在修复过程中会在基因组DNA随机引入插入、缺失和替换事件，从而引入突变。

技术优势

基因编辑技术是功能基因研究中的一把“利器”，使获得理想的编辑材料系变得简单、快速，不仅方便了基因功能研究也推动了整个生物行业的进步。艾迪晶生物基因编辑技术可编辑基因上游调控区域，以及结构基因的外显子，内含子等，也可以用于非编码RNA(如LncRNA,microRNA等)的编辑。

载体支持4种植物真核抗性基因：

（1）抗潮霉素(HPT)；

（2）抗除草剂(Bar，Glyphosate)；

（3）抗卡那霉素(NPTII)；

（4）抗壮观霉素（Spec)。

实验结果

本系统可以实现多基因打靶，在同一载体上组装多个靶点(最高可达20个靶点)，从而实现“一敲多”、“多敲一”以及“多敲多”的设计；

本系统利用多种不同的植物sgRNA启动子驱动SgRNA表达，避免在农杆菌或者植物细胞内sgRNA表达盒之间发生重组而影响敲除效率；

基于Golden Gate和Gibson克隆技术，简单、高效的实现SERNA表达盒的组装；

通过优化Cas9密码子，极大的提高了CRISPR/Cas9的编辑效率，在水稻中的平均打靶效率高达90%以上。