近日，广东省农业科学院水稻研究所联合中国水稻研究所在The Crop Journal在线发表了题为“A 9.5-kb deletion in the 1st intron of OsMADS51 enhances temperature sensitivity in rice”的研究论文。

      本研究中，广东省农科院水稻所赵雷博士利用刘耀光院士团队开发的MMEJ技术及其线上平台MMEJ-Ko（http://skl.scau.edu.cn/mmejko/）设计基于基因编辑技术的大片段删除技术，成功创制出删除9.5Kb的材料。MMEJ片段删除技术由刘耀光院士团队2020年开发。艾迪晶生物对该实验提供分子技术指导及水稻遗传转化服务，助力功能基因组学研究和遗传改良。

技术原理：

      微同源末端连接（MMEJ）是一种 DNA 修复机制，区别于非同源末端连接（non-homologous end joining，NHEJ）介导的DNA修复机制，是在DSB附近的4-25 bp的微同源序列（microhomologous sequences，MHS）之间的重组修复。利用CRISPS/Cas系统产生的DSB和MHS可以实现高效基因组大片段删除。

技术优势：

      CRISPS/Cas系统产生的DSB，通常会通过非同源末端连接（NHEJ）介导的 DNA 修复，造成靶点附近一个或多个碱基的插入/缺失，而大片段删除概率极低。利用MMEJ技术在设计靶点时两个靠近DSB的位置有4-25bp微同源序列，极大的提高大片段删除的概率，实现大片段定点删除的材料创制。

设计特点：

      MMEJ通路在细胞周期中处于活跃状态，MHS越靠近DSB位置，片段删除效率就越高；MHS的长度与删除效率没有显著关系；使用多个sgRNA 产生多个DSB可能会增加基因组片段删除效率。